urszula wysocka zielonka ad

Protokół został sprawdzony i zatwierdzony przez Komitet ds. Badania Ludzkiego Uniwersytetu Yale University School of Medicine. Eksperymentalny protokół
Wszystkie badania rozpoczęto o 8 rano po całonocnym poście od 10 do 12 godzin. Wieczorem przed badaniem wszyscy chorzy na cukrzycę zostali przyjęci do klinicznego ośrodka badawczego i otrzymywali zmienną nocną infuzję insuliny (0,6 do 1,5 pmol na kilogram masy ciała na minutę) przez cewnik teflonowy umieszczony w żyle przedłokciowej, w w celu wywołania normoglikemii (.5,5 mmol na litr). Indukcja euglikemii pozwoliła badanym osobom z cukrzycą i prawidłowym, podczas gdy mieli oni takie same stężenia glukozy w osoczu i zareagowali na identyczny przyrost powyżej linii podstawowej w stężeniu glukozy w osoczu. Rankiem badania drugi cewnik teflonowy został wprowadzony do żyły przedłokciowej przeciwnego ramienia, aby umożliwić pobranie krwi. Normalni pacjenci zostali przyjęci do ośrodka o 8 rano po tym, jak pościli przez 12 do 14 godzin, w tym czasie do każdego ramienia wprowadzono cewnik dożylny.
Techniki spektroskopii NMR
W trakcie badania badani pozostawali w pozycji leżącej na plecach w obrębie spektrometru NMR (Biospec, 1-metrowy otwór, 2,1 T); mięśnie brzuchatego łydki prawej nogi umieszczono w homogenicznej objętości magnesu, na powierzchni koncentrycznych cewek 1H-13C (płytka Lucite o grubości 6 mm została umieszczona między cewką a nogą). Nogę zapinano na paski Velcro, aby zminimalizować ruch podczas eksperymentu. Otrzymano wielościenny gradientowy obraz echa w celu potwierdzenia, że praktycznie cały sygnał NMR obserwował odbitą mięśnie brzuchata łydki. Cewki powierzchniowe, używane zarówno do nadawania, jak i odbierania, składały się z cewki wewnętrznej o średnicy 9 cm, którą wykorzystano do akwizycji 13C, oraz cewki zewnętrznej o średnicy 13 cm, którą wykorzystano do akwizycji i odsprzęgania 1H. Magnes został pomalowany za pomocą zlokalizowanego sygnału wody. Obciążone impulsy o długości 90 stopni wynosiły 150 .s dla 1H i 100 .s dla 13C. Impulsowa częstotliwość radiowa 13C podczas impulsu 13C wynosiła 400 W i była włączona przez 0,2 procent czasu cyklu. W celu rozłączenia 1H zastosowano 10 W energii fali ciągłej na częstotliwości protonu C-1 z 20-procentowym cyklem pracy. Całkowite osadzanie się ciepła nie przekraczało wytycznych Food and Drug Administration (8 W na kilogram tkanki). Widma 13C uzyskano z sekwencją 1-t-1, która została dostosowana do pobudzenia regionu 100-ppm i do zminimalizowania 30-ppm regionu lipidowego. Każdy impuls został ustawiony na 45 stopni (.75 .sec) w środku cewki. Kąt impulsu w centrum cewki wyznaczono z 2 cm kuli zawierającej kwas [13C] mrówkowy (99% wzbogacenie 13C) jako wzorzec. Normę zastosowano również w celu skorygowania wszelkich zmian współczynnika jakości (Q) cewki powierzchniowej lub wrażliwości systemu. Opóźnienie interpolacji wynosi 320 .s. Czas powtarzania wynoszący 80 milisekund był zoptymalizowany dla sygnału glikogenu C-1, dla którego składnik T1 wynosił 80 milisekund, a składnik T2 wynosił 11 milisekund. Każde spektrum wymagało wizualizacji 11 250 skanów i 15.5 minut akumulacji sygnału
[podobne: kwas dichlorooctowy, cynaryna, zhemolizowana krew ]